Tamponul citrat de sodiu este utilizat pentru izolarea ARN-ului, deoarece minimizează hidroliza bazică a lanțurilor de ARN. Acest lucru face un pas important in purificarea mRNA in timpul cercetarii genomice sau pentru studierea transcriptiei.
Soluțiile tamponate pe bază de citrat pot, de asemenea, ajuta la detectarea antigenilor în preparatele de țesut fix deoarece rupe legăturile încrucișate formate între antigeni și mediul de fixare.
Cu ghidul de mai jos, faceți un tampon de citrat de sodiu cu pH 6. Instrucțiunile nu sunt doar ușor, ci și rapide pentru a fi executate. Ar trebui să vă duc doar aproximativ 10 minute pentru a finaliza acești pași.
Două opțiuni pentru a face tamponul
Există două modalități de a face un tampon de citrat de sodiu. Mai întâi, determinați dacă aveți atât acid citric cât și baza conjugată, citrat de sodiu, cu care să lucrați. Dacă aveți doar acid citric, nu este o problemă. Încă mai puteți face tampon.
Pe de altă parte, dacă aveți atât acidul cât și baza, creați o soluție stoc din fiecare. Se amestecă 21 grame de acid citric în 1 litru de apă distilată și 29,4 grame de citrat de sodiu în 1 litru de apă distilată.
Dacă aveți numai acid citric, amestecați 2,1 grame în puțin sub 1 litru de apă distilată și treceți la etapa următoare.
Amestecarea acidului citric și a soluțiilor de citrat de sodiu
Acum că ați creat soluția stoc (dacă ați avut atât un acid cât și o bază) sau ați amestecat acidul în apă distilată (dacă nu ați făcut-o), vă puteți concentra asupra soluțiilor.
Se amestecă 82 mililitri de soluție de acid citric cu 18 mililitri de soluție de citrat de sodiu.
Apoi, se face volumul total al amestecului cu puțin sub 1 litru cu apă distilată. Lăsați suficient volum pentru a permite adăugarea de hidroxid de sodiu (NaOH) în etapa următoare.
Ajustarea pH-ului
Cu agitarea ușoară a soluției utilizând un agitator magnetic, se folosește hidroxid de sodiu 1M pentru a ajusta pH-ul amestecului la 6,0. După aceea, se face volumul final al soluției până la 1 litru cu apă distilată utilizând un balon volumetric.
Ce aveți nevoie pentru a face tamponul
Nu numai că nu vă va dura prea mult timp pentru a face tampon de citrat de sodiu, de asemenea, nu veți avea nevoie de multe materiale pentru acesta. Cu acid citric, 1M hidroxid de sodiu, apă distilată și o probă de pH calibrată, veți fi la jumătatea drumului. Utilizarea citratului de sodiu este opțională.
Efectuarea tamponului va necesita, de asemenea, un cilindru gradat de 1 litru, un balon volumetric de 1 litru și trei sticle de 1 litru de material. În sfârșit, veți avea nevoie de o agitator magnetic și un agitator magnetic.
Dacă nu aveți toate aceste materiale, luați în considerare utilizarea laboratorului în școală sau pe site-ul dvs. de lucru, astfel încât să nu trebuie să le cumpărați singur. De asemenea, puteți achiziționa online aceste materiale online sau puteți vizita un magazin de produse de specialitate în zona dvs.